【分　 类】 医药卫生
【关 键 词】 糖尿病肾病大鼠；中药复方；肾组织形态
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正文：
摘要：目的：在肾糖颗粒治疗早期糖尿病肾病取得良好临床疗效基础上,进一步研究其对糖尿病肾病大鼠病理形态的影响。方法: 首先建立糖尿病肾病模型，即通过向大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)，并同时采用高脂饲料喂养，模型建立成功后，分为正常组、治疗组、模型组，用OneTouch Ultra血糖仪测定血糖，用放射免疫法测定尿白蛋白（Alb）；行HE染色、PAS染色观察病理形态。 结果: 肾糖颗粒可降低模型大鼠血糖、尿Alb，减轻肾脏病理损害。 结论: 中药复方肾糖颗粒可以改善糖尿病肾病大鼠肾组织病理形态，延缓疾病进展
关键词：糖尿病肾病大鼠；中药复方；肾组织形态
Abstract: Objective: Treatment of sugar in the kidney achieved good early clinical diabetic nephropathy on the basis of further study in diabetic nephropathy and pathological morphology. Methods: First establishes diabetes nephrosis model, namely through assists rhzomorph (STZ) to the big mouse abdominal cavity injection chain urea, and simultaneously uses the high fat feed to feed, after the model establishes successfully, divides into the normal group, the treatment group, the model group,with the OneTouch Ultra blood glucose meter blood glucose, measured by radioimmunoassay of urinary albumin (Alb); line HE staining, PAS staining pathological. Results: The model of renal glucose particles can reduce blood glucose, urinary Alb, reduce the renal pathology. Conclusion: Renal sugar particles in the compound prescription diabetic nephropathy can improve the pathological lesion and delay disease progression
Keywords: Diabetic nephropathy rats; Traditional Chinese medicine compound prescription; Kidney organization shape
糖尿病肾病( diabetic nephropathy, DN) 是影响糖尿病肾病患者生存质量和死亡率的重要因素之一，常发展为终末期肾功能衰竭。本研究通过观察肾糖颗粒对实验性糖尿病肾病大鼠血糖、尿白蛋白（Alb）及早期肾脏结构的影响, 表明中药复方肾糖颗粒对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用，为肾糖颗粒的临床治疗提供依据。
1实验材料
1.1药物制备
链尿佐菌素（streptozotocin, STZ），美国Sigma公司生产（批号：S0130）。
PAS染色试剂盒购自上海源叶生物科技有限公司，尿ALB放射免疫分析药盒购自北京北方生物技术研究所。
肾糖颗粒由黄芪、水蛭粉组成。
肾糖颗粒制备工艺：
    水煎提取（三次）                     乙醇提取
生药煎液浓缩 浓缩液            乙醇液
 
回收乙醇       辅料制粒        干炼      包装
稠膏 湿粒 干粒       颗粒剂
 
1.2 实验动物
采用健康雄性SD大鼠70只, 体重(180 ±20)g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，在上海中医药大学实验动物中心SPF级饲养，人工光照，阴暗各12h，45%左右相对湿度的普通设施中，自由饮食，适应性饲养1周后进行试验。
2 研究方法及步骤
2.1 动物模型制作与分组
将上述实验动物随机取8只为正常组，剩下的为造模组，造模组予腹腔注射STZ（25mg/kg 每周一次），同时予高脂饲料(普通饲料加10%猪油、10%豆油、10%蔗糖)喂养，正常组给予普通饲料喂养，腹腔内注射等量枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液作对照，连续三周重复上述步骤。造模完成72小时后尾静脉采血测血糖，血糖>16.7mmol/L作为糖尿病造模成功。糖尿病造模成功一周后，留取大鼠即刻尿，测尿微量蛋白及尿肌酐（ACR），模型组显著高于正常对照组，即为糖尿病肾病造模成功，未成功的大鼠予以剔除，造模成功后根据ACR值将剩下的大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组3组，各组均8只，饲养或治疗8周后处死。
2.2治疗方法：
根据人鼠剂量换算约为人剂量的20倍，正常组和模型组予以蒸馏水进行干预，治疗组予以肾糖颗粒灌胃，每日一次。
2.3观察指标及检测方法：
2.3.1尿液检测指标：灌胃第8 周最后1 d 代谢笼收集即刻尿，采用放射免疫法测定尿微量白蛋白（Alb）。
2.3.2血液检测指标：灌胃8 周后禁食8h 后,称重、麻醉，无菌操作, 腹主动脉取血分离提取血清测血糖，血糖用OneTouch Ultra血糖仪测定
2.3.3肾组织检测指标：禁食8 h 后,称重、麻醉，无菌操作, 剖取肾脏,去除包膜后沿矢状线正中切开,取 1/2 肾脏用10%甲醛溶液固定，取小块皮质，脱水、石蜡包埋，切片，HE和PAS染色，光镜下观察肾脏病理形态。
2.4统计学方法
采用SPSS11.5 统计软件处理。计量资料用均数±标准差（X(—)±s）表示，两组间比较用t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t 检验。P <0.05 为差异有显著性。
3 结果
3.1一般状态
除正常组外，其余两组大鼠均有不同程度的毛色缺乏光泽，精神不振，活动迟缓，多饮、多尿、多食、体重减轻，并且模型组大鼠有的出现腹水等。经灌胃治疗后，治疗组上述情况得到不同程度的改善。
3.2各组之间血糖及尿Alb的比较
血糖正常组和模型组比较，正常组明显低于模型组（P<0.01），治疗组血糖明显降低，和模型组比较具有统计学差异（P<0.01）（见表1）。
尿ALB正常组和模型组比较，模型组明显高于正常组（P<0.01），而治疗组和模型组比较，治疗组尿ALB也是明显降低的（P<0.01）（见表1）。
表1 肾糖颗粒对DN 大鼠的血糖、尿Alb的影响(X(—)±S n=8)
组    别              血糖（mmol/l）           尿Alb（ng/L）

正  常  组              7.25±0.95             341.73±65.66
模  型  组              32.38±1.26▲           3008.92±1562.36▲
治  疗  组              24.59±1.98★           1017.74±260.74★

注：与正常组比较：▲ P<0.01;与模型组比较：★ P<0.01
 
3.3大鼠肾组织病理形态变化   
光镜下观察：正常组肾小球结构完整，未见肾小球肥大，肾小球毛细血管基底膜、系膜、基质也均未见明显异常改变；模型组大鼠出现肾小球系膜基质中至重度增生,基底膜增厚,球囊粘连甚至弥漫性肾小球硬化；而治疗组虽然也出现肾小球肥大，但较模型组有减轻，经肾糖颗粒治疗后有不同程度的改善。大鼠肾组织病理形态变化见图1、图2。
 
 
图1 治疗8周后大鼠肾组织HE染色形态变化
        
        正常组                   模型组                    治疗组

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