【摘要】:目的:探讨Survivin与DKK1在胸腺瘤中的表达和临床意义。方法:收集病理证实为胸腺癌、胸腺瘤以及胸腺增生的病例作为研究对象,应用免疫组织化学法进行组织染色,检验Survivin与DKK1的表达情况。结果:Survivin在胸腺癌、胸腺瘤与胸腺增生中的表达率分别是76.5%、55.7%和14.3%,DKK1在胸腺癌、胸腺瘤与胸腺增生中的阳性表达率分别为23.5%、45.9%和71.4%,均巨大差异(p<0.05)。Dkk1在胸腺瘤中的表达同Survivin阳性表达存在负相关。结论:Survivin与Dkk1在胸腺瘤中的表达和胸腺瘤的发展具有相关性,对二者进行检测能有助于诊断胸腺瘤。
【关键字】:胸腺瘤;Survivn ;DKK1;免疫组织化学;临床意义
胸腺瘤的发病率较低,且病情发展较为缓慢的肿瘤,由于胸腺瘤存在转移、复发、播散以及局部外侵等特点,因此胸腺瘤是存在潜在恶性或低度恶性的肿瘤[1]。研究Survivn与DKK1在胸腺癌、胸腺瘤以及胸腺增生中的表达情况,有助于胸腺瘤病理分型[2]。本文对病理证实为胸腺癌、胸腺瘤、胸腺增生的病例应用免疫组织化学方法研究Survivn与Dkk1表达情况,具体情况如下: 临床资料与方法 1.1临床资料
收集病理证实为胸腺癌、胸腺瘤以及胸腺增生的病例作为研究对象,有17例胸腺癌患者、61例胸腺瘤患者和14例胸腺增生患者,胸腺瘤患者中有28例为侵袭性,33例为非侵袭性。
1.2方法
应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学染色法,选择Survivn单克隆与DKK1多克隆抗体对病理组织切片中的表达情况。首先每例患者蜡块制备成厚度为5um的3张连续切片,两张用于进行免疫组织化学染色,剩余一张切片备用。其次,将68摄氏度的恒温箱中烘烤时长约20min,然后用二甲苯进行脱蜡,并应用梯度酒精进行脱水。紧接着进行抗原修复,在切片中滴加山羊血清封闭液,室温维持在20摄氏度,将多余液体甩去,然后滴加第一抗体,在4摄氏度的环境中过夜,然后用PBS缓冲液代替一抗进行阴性对照。完成上述步骤后恢复温度到37摄氏度,时间约45min,应用0.1m的PBS缓冲液进行3次冲洗,每次冲洗时间为5min。切片并滴加生物素化第二抗体,在37摄氏度的环境中孵育约20min,然后用0.1m的PBS缓冲液进行3次冲洗,每次冲洗时间为5min。下一步进行DAB显色,并应用苏木素对细胞核复染1min,充分水洗后,应用浓度为1%的盐酸酒精进行分化,应用浓度为1%的胺水反蓝,进行充分水洗,在脱水、透明后应用中性树脂进行封片,最后进行镜检。
1.3 观察指标
观察Survivn与DKK1在胸腺组织中的表达细胞量和表达强度,并应用PBS溶液代替一抗进行阴性对照,并选取已知表达为阳性的乳腺癌和肝癌切片进行阳性对照。
1.4统计学分析
所得资料应用SPSS19.0,x2比较分析计数资料,用(%)表示,t检验分析计量资料,用(±s)表示,如果P<0.05说明差异家较大,且存在统计学意义。 结果 2.1 Survivn在胸腺组织中的表达情况
Survivn在胸腺癌中的阳性表达率为76.5%,在胸腺瘤中的阳性表达率为55.7%,在胸腺增生组织中的阳性表达率为14.3%。三者间差异巨大,(p<0.05)差异具有统计学意义,详细情况如表1所示:
表1、Survivn在胸腺组织中的表达情况 类别 阳性患者(n) 表达率(%) 胸腺癌 13/17 76.5 胸腺瘤 34/61 55.7 胸腺增生 2/14 14.3
2.2 DDK1在胸腺组织中的表达情况
DDK1在胸腺癌中的阳性表达率为23.5%,在胸腺瘤中的阳性表达率为45.9%,在胸腺增生中的阳性表达率为71.4%,三者间差异明显,(p<0.05),详细情况如表2所示: