摘要 目的:研究生姜乙醇提取物对小鼠酒精性肝损伤干预保护作用。方法:设空白组,模型组,低、中、高剂量组。除空白组外,每组灌胃10ml/kg的50度酒精,1次/d,进行酒精性肝损伤,低、中、高剂量组再分别给予120mg/kg、240mg/kg、480mg/kg的生姜醇提物作为干预,空白组灌胃等量的蒸馏水作为对照,连续灌胃30天后,测定血清中谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝脏中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果:模型组ALT,AST,MDA含量增加,SOD含量下降,与空白组相比差异显著(p<0.05或p<0.01),干预组与模型组相比各指标有不同程度改善,中、高剂量组效果十分显著(p<0.01)。结论:生姜乙醇提取物对酒精性肝损伤有干预保护作用。
关键词 生姜醇提物;酒精性肝损伤;
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:
Abstract Object: To study the protective effects of the alcohol extract from Ginger on mice liver damage induced by alcohol intakes. Methods:Divide the mice into five groups: the normal group,the model group,and the low, middle, high doses group. Except for the normal group,every group was treated with 50% alcohol 10 ml/kg bw i.g for Alcoholic damage induced. Low,middle, high doses group was given 120mg/kg, 240mg/kg, 480mg/kg of the alcoholic extract from Ginger for protective effects. Normal group was given the equivalent amount of distilled water for contrast. After being continuously treated with 75d, measure the ALT ,AST, MDA, SOD values of the mice from each group. Results:The ALT、AST、MDA values of the model group mice elevated while the SOD values decreased,significantly discrepant as compared with that of the normal group(p<0.05或p<0.01).The indexes of the control group improved in different degrees comparing with model group. Effects on the middle and high doses groups were very significant(p<0.01).Conclusion:The alcohol extract from Ginger shows protective effect to liver damage induced by alcohol in mice.
Key words: Alcohol extract from Ginger; Alcoholic liver damage;
资料表明,生姜具有抗氧化和清除自由基,降胆固醇、降血脂、保肝利胆等多种功效,尤其是生姜有机溶剂提取物中含有能抑制脂质过氧化的有效成分,而由自由基导致的脂质过氧化是引起肝脏损伤和肝病进一步损伤恶化的重要因素之一,因此,作为药食兼用的天然植物,生姜在保护肝脏损伤,预防肝脏疾病方面拥有巨大的开发潜力。本实验研究生姜乙醇提取物对酒精性肝损伤的干预保护作用。
1 材料和仪器 动物 ICR小鼠,清洁级,体重25~30g,扬州大学实验动物中心提供。 1.2 药剂 生姜乙醇提取物,由实验室自主提取。方法:生姜切成颗粒状,50~60℃烘干5~6h
以70%食用乙醇在50℃浸提24h,浸提液经蒸发浓缩,冷冻干燥制成粉末后使用。 主要试剂 ALT测试盒,AST测试盒,MDA测试盒,SOD测试盒,南京建成生物工程 研究所生产;55度红星二锅头白酒,北京红星酿酒厂生产。
1.4 主要仪器 TGL-16冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂),Spectrumlab 775s紫外可见分光光度机(上海棱光技术有限公司),数显恒温水浴箱(国华电器有限公司)。
2 实验方法
2.1 动物分组 ICR小鼠56只,以Spss10.0软件随机分成五组,每组雌雄各半,其中空白组(A组)8只,模型组(B组)12只,低剂量干预组(C组)12只,中剂量干预组(D组)12只,高剂量干预组(E组)12只。
2.2 给药 从实验开始后,每天下午灌胃给药,A组灌胃10ml/kg体重蒸馏水,B~E组各灌胃10ml/kg体重的50%(v/v)白酒,干预组(C、D、E组)灌酒30min后,加灌低中高剂量的生姜醇提物,C组120mg/kg体重,D组240mg/kg体重,E组480mg/kg体重,而A组和B组相应加灌等量蒸馏水。实验连续进行30天,期间供给饮水和普通的鼠粮。
2.3 观测指标及方法
2.3.1 给药期间观察动物的一般状态,每周称体重一次,记录体重变化情况。
2.3.2 末次给药后禁食12h,称重处死。
2.3.3 摘眼球取血,分离血清,4000R/min离心,10min。测量各组血清中ALT、AST含量。
原理:采用赖氏法;方法:按照测试盒提供的方法。
2.3.4 处死后取肝脏,生理盐水冲洗,滤纸吸干,称肝脏重,计算肝脏指数。
肝脏指数(%)=肝脏重(g)/体重(g)×100%
2.3.5 取相同部位肝组织,以生理盐水制成10%肝匀浆。4000R/min,离心10min,取上清液,测定肝脏MDA,SOD含量。原理:MDA含量测定采用硫代巴比妥酸 (TBA )比色法,SOD活性测定采用亚硝酸盐法;方法:按照测试盒提供的方法。
2.4 统计方法
采用Spss软件进行数据分析统计,组间分析以P<0.05为差异有统计意义。
3 结果
3.1 生姜醇提物对实验小鼠体重和肝指数的影响 干预30d后,只有模型组体重下降,与空白组相比差异极显著(p<0.01),干预组体重有所上升,但与模型组相比差异不显著(p>0.05);模型组的肝脏指数与空白组相比显著增加(p<0.01),干预组与模型组相比显著下降(p<0.01~0.05)。结果见表1。
Table 1 The changes of weight and liver index in different groups in mice(n≥8) Group Dosage
mg/kg Weight(g) Growth rate
% Liver Weight(g) Liver index
100% Beginning Finish Normal group — 27.25 31.80 16.07 1.52 4.78 Model group — 27.77 26.08c -6.09c 1.54 5.90c Low doses group 120 28.12 28.70 2.06 1.34 4.67d Middle doses group 240 27.22 28.98 6.47 1.44 4.97b High doses group 480 27.82 28.98 4.17 1.42 4.90d a:p<.0.05,vs Normal group;b:p<0.05,vs Model group;c:p<0.01,vs Normal group;d:p<0.01,vs Model group
3.2 生姜醇提物对实验小鼠血清AST,ALT的影响 与空白组相比,模型组小鼠血清中AST,ALT水平显著增高(P<0.05),其中AST增高极为显著(P<0.01);干预组与模型组相比AST水平都显著下降(p<0.01),而ALT水平在中、高剂量组中下降明显(p<0.05和p<0.01),在低剂量组中下降不显著(p>0.05);其中高剂量的ALT、AST水平接近空白组。结果见表2。
Table 2 The changes of AST,ALT activity in different groups in mice (n≥8, ±s) Group Dosage
mg/kg AST
IU/L ALT
IU/L Normal group — 22.41±4.5 12.95±5.0 Model group — 32.57±4.1c 16.78±1.4a Low doses group 120 26.49±6.3d 14.68±0.5 Middle doses group 240 24.68±4.7d 13.48±1.5b High doses group 480 22.79±2.3d 12.59±3.7d a:p<.0.05,vs Normal group;b:p<0.05,vs Model group;c:p<0.01,vs Normal group;d:p<0.01,vs Model group
3.3 生姜醇提物对实验小鼠肝脏MDA,SOD的干预影响 与空白组相比,模型组肝脏MDA含量显著增加(p<0.01),而SOD含量显著下降(p<0.05);干预组MDA含量与模型组相比都极显著下降(p<0.01),中、高剂量组SOD含量与模型组相比极显著增加(p<0.01),也高于空白组含量,低剂量组SOD含量与模型组相比增加不显著(p>0.05)。结果见表3。