近年来，随着成分输血技术的不断发展，血小板(PLT)输注在临床输血治疗中越来越受到关注，特别是在治疗因PLT功能异常及数量减少所致的出血性疾病中起着非常重要的作用。但长期或多次输血的患者较易产生同种免疫抗体，导致血小板输注无效(PTR)，严重影响临床PLT输注疗效[1-2]。为了有效解决这一问题，我们采用固相凝集法对52例PTR患者进行PLT抗体检测及PLT交叉配型后进行输注，观察其PLT抗体的特异性及分析相关因素，旨在为PTR患者提高PLT输注效果提供科学的实验依据，现报道如下。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　选择2014年9月～2016年8月在湛江中心人民医院住院治疗的52例PTR患者，其中男28例，女24例，年龄1～61岁;慢性粒细胞性白血病8例，PLT减少症7例，骨髓增生异常综合征6例，多发性骨髓瘤5例，再生障碍性贫血5例，恶性淋巴瘤2例，急性白血病3例，直肠癌6例，乳腺癌4例，胃癌、肺癌各3例，所有疾病的诊断均符合相关诊断标准。所有病例经治疗后均见PLT减少并出现PTR，且排除因发热、感染、脾肿大和DIC等影响PLT输注疗效的非免疫性因素，临床表现可见牙龈、皮肤、消化道、粘膜出血，并均有多次输PLT或输血史。全体患者及其家属均同意并签署知情同意书，自愿参与本研究，符合伦理学要求。

　　1.2 研究方法

　　1.2.1 检测方法 抽取患者清晨的空腹静脉血3 ml,注入内含有枸橼酸钠抗凝剂的蓝盖试管内，混匀待检。采用固相凝集法检测PLT抗体，如检测结果为阳性，则用同一方法再进行交叉配型实验。

　　1.2.2 血小板的输注方法 所有患者均输注由湛江市中心血站配制的单采PLT，血容量150～250 ml/袋，PLT含量≧ 2.5×1011，WBC残余量≦ 5.0×108，成人患者每次输注1U单采PLT,未成人患者每次输注0.5 U单采PLT,ABO同型输注，输注前后须对供受相方进行正反定型及血型交叉配合试验。对于单采PLT须在6 h内输注，观察并记录每次输注前、及输注后1 h和24 h的PLT数量。

　　1.3 观察指标及评价

　　如果患者的PLT在输注后计数增加，出血停止或临床症状有明显改善，则判定为PLT输注有效;如果患者的PLT在输注后计数未增高、出血症状也无好转则判定为PTR。PLT计数增加指数(CCI)是临床判断PLT输注效果较为简便和常用的指标，CCI=(输注后PLT增加数(109/L)×体表面积(m2)/输入PLT总数(1011/L)，体表面积=0.0061×患者身高(cm)+0.0128×体重(kg)-0.01529。若患者在输注PLT 1 h后CCI小于7.5，24 h后小于4.5，连续2次均如此，则判断为PTR[3]。

　　1.4 统计学分析

　　应用SPSS 13.0统计软件对患者的临床资料进行分析，计数资料采用卡方检验，计量资料采用t检验，以P<0.05表明数据对比差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 血小板抗体检测结果

　　采用固相凝集法检测52例PTR患者的PLT抗体，有12例患者的PLT抗体为阴性，40例患者的PLT抗体为阳性，阳性率为76.9%;在PLT抗体阳性者中有33例(82.5%)患者检测到HLA-I抗体阳性，2例(5.0%)患者检测到HPA抗体阳性，有5例(12.5%)患者HLA-I+HPA抗体阳性。

　　2.2 血小板抗体检测结果对血小板输注效果的影响

　　PLT阳性组患者1h及24h的CCI值分别为(6.49±0.98)×109/L及(3.15±0.71)×109/L，PLT阴性组患者1h及24h的CCI值分别为(15.76±4.01)×109/L及(7.88±2.30)×109/L，两组患者1h及24h的CCI值比较，差异均有统计学意义(P<0.01);PLT抗体阳性患者的无效输注率为75.0%(30/40)，PLT阴性组患者的无效输注率为16.7%(2/12),两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。详见表1。

表1 两组患者血小板抗体CCI值及输注无效率比较 组别 n CCI值 (±s) 输注无效 输注有效 输注无效率

　　1h 24h (%) 阳性组 40 6.49±0.98* 3.15±0.71* 30 10 75.0*

　　阴性组 12 15.76±4.01 7.88±2.30 2 9 16.7 与阴性组比较，均*P<0.01。

　　2.3 交叉配型组与未交叉配型组血小板的输注效果比较 将40例PLT抗体阳性患者随机分为2组，未交叉配型组与交叉配型组，每组20例。其中未交叉配型组有17例患者HLA-I抗体阳性、1例HPA抗体阳性和2例HLA-I+HPA抗体阳性;交叉配型组有16例患者HLA-I抗体阳性、1例HPA抗体阳性和3例HLA-I+HPA抗体阳性。两组患者PLT的输注有效率比较，差异有显著统计学意义(P<0.01)。详见表2。

　　表2 交叉配型组与未交叉配型组血小板的输注效果比较[n(%)] 组别 n 输注无效 输注有效 有效率(%) 配型组 20 3 17 85.0# 未配型组 20 20 0 0.0 与未交叉配型组比较，#P<0.01

　　3 讨论

　　PLT输注是预防和治疗PLT减少引发的出血性疾病的有效措施，特别是对于严重出血危及生命的患者，具有较高的临床应用价值。导致PTR的因素大致可分为免疫性因素及非免疫性因素。免疫性因素是指体内ABO血型不合、HLA抗原和HPA抗原不合所产生的相应PLT抗体，此类抗体与表达相应抗原的PLT结合即致敏PLT，从而加速被血液循环系统所清除，导致PTR的发生。同种免疫性抗体是的产生是引起PTR的重要因素[4]。有报道[5]认为，HLA抗体是引起PTR最常见的免疫因素，占所有免疫因素的81.8%，占所有病因的25%。我们的研究结果显示，52例PTR患者中，有40例PLT抗体为阳性，达76.9%，结果提示免疫性因素是引起PTR的主要原因。在40例PLT阳性患者中，有33例检测出HLA-I抗体阳性，占82.5%，说明引起PTR免疫性因素的主要原因与HLA抗原紧密相关。目前PLT纠正指数CCI已被临床广泛应用于评价PLT输注疗效。刘更夫等[6]报道，血小板CD62P表达率越高，CCI越低，血小板输注效果越差;也有报道显示，1h和24h CCI值与血小板抗体是否阳性及患者是否有并发症均有关[7]。本资料结果显示，PLT抗体阳性患者1h及24h的CCI值均明显低于PLT阴性患者，差异均有统计学意义(P<0.01);PLT抗体阳性组患者的无效输注率显著高于阴性组患者，差异有统计学意义(P<0.01)。结果说明PLT抗体的产生与出现PTR密切相关，提示PLT抗体阳性可预测PTR的发生。同时我们也观察到PLT阳性患者的无效输注率为75%，PLT阴性患者的无效输注率为16.7%，说明PLT抗体阳性未必一定会导致PTR的发生，PLT抗体阴性也可能会发生PTR，提示PLT输注疗效与免疫性因素和非免疫性因素均相关。PLT交叉配型主要是检验受血者血清中是否含有对抗供血者PLT抗原的抗体。我们应用固相凝集法对20例PLT阳性患者进行了HLA及HPA交叉配型试验，结果显示未配型组PLT输注有效率为0.0%，而配型组PLT输注有效率为85.0%，可见PLT交叉配型能明显提高PLT输注有效率。同时我们也发现PLT交叉配型结果虽为阴性，但还有个别患者出现PTR，这是否与患者长期输血后产生PLT同种抗体有关，有待进一步探讨研究。

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