正文:[14]。
目前,常用的幼龄母畜超排方法多为多种激素处理的方法。Armstrong采用GnRH、FSH+LH、hCG三种方法对犊牛和羔羊进行处理,均获得了可用的卵母细胞,但FSH+LH的方法获得的卵母细胞数和囊胚率较另外两种方法高
[15]。后来Grazyna又采用FSH、FSH+eCG、FSH+eCG+GnRH对1月龄左右的羔羊进行处理,结果FSH+eCG的方法获得的卵丘卵母细胞复合体数量最高,单独注射FSH的方法获得的囊胚率最高
[16, 17]。在国内,目前对羔羊进行激素诱导也有少许研究。旭日干等对2~3月龄的羔山羊进行FSH、FSH+LH、eCG三种不同方法的处理,结果与Armstrong的结论一致,也表明FSH+LH的方法获得的卵母细胞的数量最多,但囊胚率却很低
[18]。
该实验采用GnRH+FSH、PMSG+FSH、CIDR+FSH和CIDR+PMSG+FSH的超排方法,从研究结果看,CIDR+PMSG+FSH处理组和CIDR+FSH处理组无论是在获得的可用卵母细胞数量上,还是在卵裂率和囊胚率上,均优于GnRH+FSH处理组和PMSG+FSH处理组。CIDR含有适当浓度的孕酮,其缓慢释放,可以保持血液中孕酮的浓度,同时抑制垂体释放促卵泡素。在撤栓前注射FSH主要是促进卵泡的生长和发育,它可刺激颗粒细胞的芳香化酶活性,将卵泡的微环境由雄激素转变成为雌激素,进而使得卵泡能够成熟排卵
[19],但在体内的半衰期较短,所以需要多次注射。PMSG的半衰期较长,使用方便,对动物刺激性小,可以弥补FSH作用时间短的不足,并且PMSG同时具有FSH和LH两种促性腺激素的作用特点,它能有效促进卵巢卵泡的生长发育和卵泡颗粒细胞的增生及雌激素的合成和分泌,但单独使用PMSG会使卵巢上出现第二次卵泡波,产生高浓度的雌激素,导致卵巢上未排卵的卵泡数量增加,黄体早期退化等,以致影响超排效果。由此三者配合使用以取得更好的超排效果。
GnRH是丘脑下部促垂体区分泌的一种高级生殖调节激素,生理剂量的GnRH可以促使垂体合成与释放LH和FSH,但以LH为主,超排时使用GnRH目的是促使母畜排出较多成熟卵子。但GnRH没有产生积极效果的原因可能是因为GnRH可能会使血液中LH峰过早到来从而使卵泡过早成熟排卵,而体外成熟时间并没有变化,以至于一些卵子在体外受精时已经老化,不能正常受精
[20],导致卵裂率和囊胚率低于CIDR+FSH和CIDR+PMSG+FSH处理组。CIDR中含有孕酮,在体内,孕酮水平的略微上升可以对LH/FSH峰起协同作用,促进卵母细胞的最终成熟和排卵
[21],反之,孕酮水平越低说明成熟卵泡越少,Kleemnan等报道在绵羊妊娠前3天注射孕酮可以促进其胚胎的生长,张振汉等也报道了类似的结果
[22]。这些都表明较高孕酮水平是较多胚胎早期生长所必需的。但在体外,孕酮对卵母细胞体外成熟和体外受精的作用还有争议。邹淑花等的研究表明微量的孕酮对卵母细胞的成熟和胚胎质量有利
[23],但也有研究显示孕酮水平的升高对卵母细胞的质量和卵裂率、囊胚率无影响
[24—26]。本实验结果显示用含有孕酮的CIDR超排处理后,卵母细胞卵裂率和囊胚率均好于未用CIDR处理的组别,与邹淑花等人的结果一致,其原因还有待进一步研究。
参考文献
[1]孙新明,魏泓,王爱平等.山羊不同来源卵母细胞体外受精的研究[J].西南农业大学学报(自然科学版) 2005,27(2):198.
[2]Worthington C A, Kennedy J P. Ovarian response to exogenous hormones in six week old lambs [J]. Aust. J. Biol. Sci,1979, 32:91-95.
[3]Trounson A O, Willadsen S M, Moor R M. Reproductive function in prepubertal lambs: ovulation embryos development and ovarian steroidogenesis [J]. J. Reprod. Fert, 1977 ,49:69-75.
[4]武建朝.利用性成熟前山羊卵泡卵母细胞体外生产胚胎的研究[D].南京:南京农业大学,2007:17.
[5]Galli G, Crotti G, Notari C, et al. Embryo production by ovum pick up from live donors [J]. Theriogenology,2001,55:1341-1357.
[6]Anel L, SevillanoC, Alegre B, et al. Repeated laparoscopic follicular aspiration in lambs [J]. Theirogenology,1997,47(1):152.
[7]Kalita A, Baishya G, Bhattacharya M. Development of ovary in Assam goat from birth to six
Months of age: a histomorphometrical study[J].Int.J.Anim.Sci.2000,70:248-250.
[8]Kalita A, Baishya G, Chakravarty P. Age-related morphological characterization of follicles and oocytes in Assam goat from birth to 6 month of age[J].Int. J. Anim. Sci. 2001,71:534-536.
[9] Land R B. Number of oocytes present at birth in the ovaries of pure and finnish landrace cross blackface and welsh sheep[J].J Reprod Fertil. 1970, 21:517-521.
[10]Tassell R, Chamley W A, Kennedy J P. Gonadotrophin levels end ovarian development in the neonatal ewe Iamb [J]. Auet J Biol Sci. 1978, 31:267-273.
[11]Bartlewski P M, Beard A P, Cook S J,Rawlings N C. Ovarian activity during sexual maturation and following introduction of the ram to ewe lambs [J].Small Ruminant Res.2002, 43:37-44.
[12]Rawlings N C, Churehill I J. Effeet of naloxone on gonadotrophin secretion at various stages of development in the ewe lamb [J].J. ReProd. Fertil.1990, 89:503-509.
[13]Ebling F J O, Kushler R H, Foster D L. Pulsatile LH secretion during sexual maturation: Photoperiodic regulation in the presence and absence of ovarian steroid feed back as determined in the same individual [J]. Neuroendocrinology. 1990, 52:229一237.
[14]Padmanabhan V, Mieher C D, Brondy M, I’Anson H, Wood R I, Landefeld T D, Foster D L, Beitins I Z. Circulating bioactive follicle-stimulating hormone and less acidic follicle-stimulating hormone isoforms increase during experimental induction of puberty in the female lamb [J].Endocrinology. 1992, 131:213-220.
[15] Armstrong D T, Holm P, Irvine B, et al. Pregnancies and live birth from in vitro fertilitization of calf occytes collected by laparoscopic follicular aspiration [J]. Theriogenology, 1992, 38: 667-678.
[16]Ptak G, Loi P, Dattena M, et al. Offspring from one-month old lambs: studies on the developmental capability of prepubertal oocytes [J]. Bio. Reprod, 1999, 61: 1568-1574.
[17] Ptak G, Tischner M, Bernabò N, et al. Donor-dependent developmental competence of oocytes from lambs subjected to repeated hormonal stimulation [J]. Bio. Reprod, 2003, 69: 278-285.
[18]张锁链,刘东军,旭日干,等.羔山羊卵泡的发育及卵母细胞体外成熟的研究[J].内蒙古大学学报, 1996, 27: 256-261.
[19]皮文辉.绵羊卵母细胞体外成熟与体外受精的初步研究[D].广西,广西大学,2003:4.
[20]李建栋,史福艳,董雅娟,等.GnRH类似物(LHRH-A3)注射方案对奶牛超排效果的影响[J].中国奶牛,2006,6:31
[21]唐奕,肖红梅,林戈,等.卵泡晚期孕酮水平对体外受精结局的影响[J].中国医学工程,2007,15(2):168.
[22]吕津.提高山羊超数排卵效果的研究[D].河北,河北农业大学,2005:13.
[23]邹淑花,吴瑞英,韩双,等.体外受精-胚胎移植中人绒毛膜促性腺激素注射日血清雌二醇、孕酮水平与妊娠率[J].生殖医学杂志,2002,11(5):304.
[24]Fanchin R, Righini C, Olivennes F, et al. Premature progesterone elevation do not alters oocyte quality
in vitro fertilization [J]. Fertil Steril,1996,65(5):1178.
[25]Ozcakir H T, Levi R, Tavmergen E, et al. Premature luteinization defined as progesterone estradiol ratio>1 on hCG administration day seems to adversely affect clinical outcome in long gonadotropin releasing hormone agonist cycles [J].J Obstet Gynaecol Res,2004,30(2):100-104.
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