2.6 毛细管电泳检测法(CE)
毛细管电泳检测法作为三聚氰胺的检测方法[20-23]之一具有实验用量少、不需要昂贵的离子对试剂,分析成本低、以缓冲溶液为流动相,无污染等优点。该方法是基于被分离组分之间的淌度和其分配系数的不同而实现分离的一种电分离方法,常以缓冲溶液为流动相,在pH=2-3之间进行分离。该法常用检测器有紫外检测器、二极管阵列检测器、安培检测器、四级管阵列和质谱检测器。毛细管电泳法由于进样量少、流动相消耗量较少,使得稳定性没有高效液相色谱法好。
2.7 近红外线吸收检测法
在三聚氰胺的分子结构中,三个碳原子分别与两个N原子和一个NH2连接。虽然 C-N键的谱峰很难识别,但是NH2的波动却是正好处于近红外区域,因此可以对三聚氰胺进行近红外分析[24]。该技术原理是用一种特定波长的近红外线照射被检样品,根据样品中三聚氰胺对红外线的吸收强弱来实现其含量的实时监测,该法是一种无接触、无损伤和无危害的检测方法。对于三聚氰胺来说,其含量越高所反射出的光线强度就越弱。同时该法预先扣除了蛋白质中NH2含量的影响,选择性相对较好。
2.8 比色法
由于牛奶中各种蛋白质基质可能干扰三聚氰胺的检测, Fang Wei等[25]把基于酪蛋白的牛奶成分分离,然后向溶液中加入金的纳米颗粒。金的纳米颗粒与三聚氰胺的相互作用导致了显著的颜色变化,显示出三聚氰胺的存在。当三聚氰胺存在的时候,溶液的颜色在几秒钟内从红色变成了蓝色,而且可以通过视觉观察和分光光度测定法检测。该法提供了一种使用纳米颗粒的高灵敏度探测手段,从而防止人们因为摄入三聚氰胺而受到伤害的独特机遇,对乳制品早期筛查提供了一种可行的方法。
2.9免疫学法——试剂盒检测法(ELISA)
免疫学法是一种快速检测三聚氰胺的方法,其原理是利用萃取液通过均质及震荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行免疫测定。样品经过甲醇离心处理,氮气吹干再次甲醇溶解后放入到试剂盒中,加入三聚氰胺HRP酶标记物,轻轻混合60S,孵育半小时。将微空中的溶液倒入水槽中,用洗液洗板多次。在吸水纸上拍打,向个孔中加入底物溶液,孵育半小时,最后加入终止液体,用酶标记仪在450nm下测吸光度。然后以三聚氰胺浓度半对数为横坐标作标准曲线, 确定被测样品的浓度[26]。该法操作简便,分析速度快,可大批量筛选,其检出限达到10ug/kg。但是在检测过程中有假阳性问题,因此对阳性样品需确证方法进行确证。
3 展望
以上叙述的三聚氰胺几种检测方法基本上都可以满足实验室对三聚氰胺的检测,分析工作者需要根据三聚氰胺的用途选择合理的分析方法,其中重量法、电位滴定法可用于工业品中三聚氰胺的检测,GC-MS、HPLC、LC-MS、CE、比色法、免疫学法可以用于食品中三聚氰胺的微量检测。随着科学技术的发展,分析方法的更新日新月异,简单、快速、高效检测三聚氰胺将是众望所归。
食品检测中对三聚氰胺的检测关系到人们的身心健康,其分析方法的选择需具备以下几个优点。(1)对三聚氰胺的检测准确,检测限小,重现性好; (2)适合现场、快速检测,平均每个样品检测时间小于30分钟(包括样品前处理时间);(3)技术产品或仪器设备成本较低,运行费用低。 今后的三聚氰胺检测进展可分为以下两个方向:一是进一步研发成本更低,更高效的化学显色法,免疫学法,作为三聚氰胺含量检测的初次筛选方法;二是研发精度更高的仪器,使得准确度更高,检出限更低。
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