图2 料液比对黄酮含量提取的影响

　　Fig.2 Extract results of flavonoids with the different solid to liquid ratio

　　2.1.2 提取时间对黄酮含量的影响

　　由1.3.3单因素分析测定，固定料液比和提取溶剂，改变提取时间，实验结果见表3。

　　表3 提取时间对总黄酮提取量的影响

　　Table.3 Extract results of flavonoids with the different time 提取时间(min) 10 20 30 40 样品吸光度 0.164 0.280 0.351 0.338 总黄酮量(mg) 1.060 1.763 2.194 2.114

　　从图3可以看出，超声波提取时间在10min-30min时，随时间的增加，黄酮提取含量逐渐增加，30min之后，提取效果没有显著的变化，故一般选提取时间为30min为宜。

　　图3 提取时间对总黄酮提取量的影响

　　Fig.3 Extract results of flavonoids with the different time

　　2.1.3 提取剂浓度对黄酮含量的影响

　　由1.3.3单因素分析测定，固定提取时间和料液比，改变提取溶剂，实验结果见表 4。

　　表4 乙醇浓度对样品的影响

　　Table.4 Extract results of flavonoids with the different concentraction 乙醇浓度 50% 60% 70% 80% 90% 无水乙醇 样品吸光度

　　总黄酮量(mg) 0.780

　　4.794 0.835

　　5.368 0.648

　　3.994 0.562

　　3.472 0.439

　　2.726 0.356

　　2.224 由图4可见，当用60%乙醇作提取溶剂时，样品中总黄酮的提取效果最好。

　　图4 提取剂浓度对黄酮含量提取的影响

　　Fig.4 Extract results of flavonoids with the different concentraction

　　2.2 正交试验结果

　　根据单因素试验结果，对料液比、提取时间和提取剂浓度3个因素进行 L9(34)正交试验(见表5)，结果见表6、表7。

　　表5 因素与水平表

　　Table.5 Factors and levels 水平 因 素 A料液比 B提取时间(min) C乙醇浓度(%) 1 1：15 20 50 2 1：20 30 60 3 1：25 40 70

　　表6 正交试验结果

　　Table.6 The arrangement of factors and results 因素 结果 试验号 A料液比 B提取时间 C乙醇浓度 黄酮提取量 1 1 1 1 4.800 2 1 2 2 5.066 3 1 3 3 4.821 4 2 1 2 5.377 5 2 2 3 5.340 6 2 3 1 5.359 7 3 1 3 4.569 8 3 2 1 4.869 9 3 3 2 4.925 k1 4.896 4.915 5.009 k2 5.359 5.092 5.123 k3 4.788 5.035 4.910 R 0.571 0.177 0.213

　　表7 方差分析(完全随机模型)

　　Table.7 Variance analysis (complete stochastic model) 变异来源 平方和 自由度 均方 F值 p值 A料液比 0.552 2 0.276 478.954 0.002 B提取时间 0.049 2 0.024 42.184 0.023 C乙醇浓度 0.068 2 0.034 58.940 0.017 误差 0.001 2 0.001

　　表7方差分析结果表明，各因素对试验结果均有显著影响。又由表6可知，因素主次顺序A>C>B，料液比对提取量的影响最大，其次是乙醇浓度，提取时间对提取量的影响最小。

　　由表6可知，在正交试验设计的范围内，最佳实验方案为4号试验(A2B1C2)，即料液比1：20，提取时间为30分钟，溶剂浓度60%乙醇。

　　2.4 精密度实验结果

　　由1.3.5精密度实验测定结果见表8。由表8可知平均提取量为5.370mg，标准偏差为0.0922，RSD=1.717%，证明实验精密度较好。

　　表8 保健食品总黄酮提取精密度试验

　　Table.8 The experiments of precision in health food 平行样号 1 2 3 4 5 吸光度 0.869 0.879 0.871 0.874 0.883 总黄酮量(mg) 5.332 5.394 5.344 5.364 5.418 =5.370mg S=0.0922 RSD=0.01717

　　2.5 回收率实验结果

　　由1.3.6回收率实验测定得到表9中数据。由表9可知，回收率为95%~104%，证明实验准确度很好。

　　表9 保健食品总黄酮回收率试验

　　Table.9 The experiments of recovery in health food 样品本底值(μg) 加标量(μg) 加标后测定值(μg) 回收率(%) 1079 100 1183 104 1063 100 1157 96 1084 100 1179 95

　　3. 讨论

　　本试验建立了以芦丁为标准品，用乙醇超声提取，紫外分光光度法测定保健食品中总黄酮含量的方法，本方法简便可行，精密度好，回收率好。通过单因素试验研究了各因素对总黄酮提取量的影响。正交试验表明影响黄酮提取量的因素主次顺序是：料液比>乙醇浓度>提取时间。正交试验确定了保健食品中总黄酮的提取最佳条件是：60%的乙醇，料液比1：20，提取时间20min。试验表明，该试验在最佳条件下，保健食品中黄酮提取量达到5.370mg。本法可用于保健食品和某些食品中总黄酮的检测。

　　参考文献

　　1. 佟永薇.黄酮类化合物提取方法的研究及展望[J].食品研究与开发. 2008,29(7):188

　　2. 刘建祥，李英 等.保健食品中总黄酮的提取及含量测定研究[J].食品研究与开发.2008, 29 (9):116

　　3. 王立升，刘力恒 ，黄仁彬.超声波提取小叶榕叶总黄酮工艺研究[J].食品研究与开发，2007，(12)：91—95

　　4. 肖香兰. 保健食品中总黄酮的测定方法[J]. 中国卫生检验杂志. 2007，17(6):1037

　　5. 李松青. 超声波提取分光光度法测定保健食品中总黄酮[J]. 中国卫生检验杂志. 2007，17(2):363

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