摘要：目的：对血小板输注无效（PTR）患者进行血小板抗体检测及进行血小板交叉配型，观察血小板输注效果，以便为探讨科学的血小板输注方法提供参考依据。方法：采用固相凝集法检测我院52例PTR患者的血小板抗体，应用血小板纠正指数（CCI）评估血小板阳性及阴性患者1h及24h的血小板输注效果，分析血小板检测结果对血小板输注效果的影响，比较交叉配型组及未交叉配型组血小
板阳性患者的血小板输注效果。结果：在52例PTR患者中，血小板抗体阳性率为76.9%（40/52），其中HLA-I抗体33例，HPA抗体2例，HLA-I+HPA抗体5例；血小板阳性患者的无效输注率75%（30/40）明显低于血小板阴性患者16.7%（2/12），差异有统计学意义；血小板抗体阳性患者1h及24h的CCI值均明显高于血小板阴性患者（P<0.01）；交叉配型组患者的血小板有效输注率（85.0%）
明显高于未交叉配型组（0.0%），差异有统计学意义（P<0.01）。结论：血小板抗体的产生是导致PTR的重要因素，血小板交叉配型能减少同种免疫反应，配合性输注可明显提高PTR患者的输注效果。
关键词：血小板抗体；血小板输注无效；交叉配型；输注效果
中图分类号:R457.1        文献标识码:B
近年来，随着成分输血技术的不断发展，血小板（PLT）输注在临床输血治疗中越来越受到关注，特别是在治疗因PLT功能异常及数量减少所致的出血性疾病中起着非常重要的作用。但长期或多次输血的患者较易产生同种免疫抗体，导致血小板输注无效（PTR），严重影响临床PLT输注疗效[1-2]。为了有效解决这一问题，我们采用固相凝集法对52例PTR患者进行PLT抗体检测及PLT交叉配型后进行输注，观察其PLT抗体的特异性及分析相关因素，旨在为PTR患者提高PLT输注效果提供科学的实验依据，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2014年9月～201６年8月在湛江中心人民医院住院治疗的52例PTR患者，其中男28例，女24例，年龄1～61岁；慢性粒细胞性白血病8例，PLT减少症7例，骨髓增生异常综合征6例，多发性骨髓瘤5例，再生障碍性贫血5例，恶性淋巴瘤2例，急性白血病3例，直肠癌6例，乳腺癌4例，胃癌、肺癌各3例，所有疾病的诊断均符合相关诊断标准。所有病例经治疗后均见PLT减少并出现PTR，且排除因发热、感染、脾肿大和DIC等影响PLT输注疗效的非免疫性因素，临床表现可见牙龈、皮肤、消化道、粘膜出血，并均有多次输PLT或输血史。全体患者及其家属均同意并签署知情同意书，自愿参与本研究，符合伦理学要求。
1.2 研究方法
1.2.1 检测方法  抽取患者清晨的空腹静脉血3 ml,注入内含有枸橼酸钠抗凝剂的蓝盖试管内，混匀待检。采用固相凝集法检测PLT抗体，如检测结果为阳性，则用同一方法再进行交叉配型实验。
1.2.2 血小板的输注方法  所有患者均输注由湛江市中心血站配制的单采PLT，血容量150～250 ml/袋，PLT含量≧ 2.5×1011，WBC残余量≦ 5.0×108，成人患者每次输注1U单采PLT,未成人患者每次输注0.5 U单采PLT,ABO同型输注，输注前后须对供受相方进行正反定型及血型交叉配合试验。对于单采PLT须在6 h内输注，观察并记录每次输注前、及输注后1 h和24 h的PLT数量。
1.3 观察指标及评价
如果患者的PLT在输注后计数增加，出血停止或临床症状有明显改善，则判定为PLT输注有效；如果患者的PLT在输注后计数未增高、出血症状也无好转则判定为PTR。PLT计数增加指数（CCI）是临床判断PLT输注效果较为简便和常用的指标，CCI=（输注后PLT增加数（109/L）×体表面积（m2）/输入PLT总数（1011/L），体表面积=0.0061×患者身高（cm）+0.0128×体重(kg)-0.01529。若患者在输注PLT 1 h后CCI小于7.5，24 h后小于4.5，连续2次均如此，则判断为PTR[3]。
 
1.4 统计学分析
应用SPSS 13.0统计软件对患者的临床资料进行分析，计数资料采用卡方检验，计量资料采用t检验，以P<0.05表明数据对比差异有统计学意义。
2 结果
2.1 血小板抗体检测结果
采用固相凝集法检测52例PTR患者的PLT抗体，有12例患者的PLT抗体为阴性，40例患者的PLT抗体为阳性，阳性率为76.9%；在PLT抗体阳性者中有33例（82.5%）患者检测到HLA-I抗体阳性，2例（5.0%）患者检测到HPA抗体阳性，有5例（12.5%）患者HLA-I+HPA抗体阳性。
2.2 血小板抗体检测结果对血小板输注效果的影响
    PLT阳性组患者1h及24h的CCI值分别为（6.49±0.98）×109/L及（3.15±0.71）×109/L，PLT阴性组患者1h及24h的CCI值分别为（15.76±4.01）×109/L及（7.88±2.30）×109/L，两组患者1h及24h的CCI值比较，差异均有统计学意义（P<0.01）；PLT抗体阳性患者的无效输注率为75.0%（30/40），PLT阴性组患者的无效输注率为16.7%（2/12）,两组比较差异有统计学意义（P<0.01）。详见表1。
         表1    两组患者血小板抗体CCI值及输注无效率比较
  组别   n           CCI值   （±s）   输注无效  输注有效  输注无效率
                  1h           24h                             （%）

阳性组  40   6.49±0.98*    3.15±0.71*      30       10        75.0*
阴性组  12   15.76±4.01    7.88±2.30       2        9        16.7        

与阴性组比较，均*P<0.01。
2.3 交叉配型组与未交叉配型组血小板的输注效果比较  将40例PLT抗体阳性患者随机分为2组，未交叉配型组与交叉配型组，每组20例。其中未交叉配型组有17例患者HLA-I抗体阳性、1例HPA抗体阳性和2例HLA-I+HPA抗体阳性；交叉配型组有16例患者HLA-I抗体阳性、1例HPA抗体阳性和3例HLA-I+HPA抗体阳性。两组患者PLT的输注有效率比较，差异有显著统计学意义（P<0.01）。详见表2。
           表2   交叉配型组与未交叉配型组血小板的输注效果比较[n（%）]
    组别         n       输注无效        输注有效        有效率（%）

  配型组      20         3              17              85.0#

  未配型组    20        20               0               0.0

   与未交叉配型组比较，#P<0.01
3 讨论
PLT输注是预防和治疗PLT减少引发的出血性疾病的有效措施，特别是对于严重出血危及生命的患者，具有较高的临床应用价值。导致PTR的因素大致可分为免疫性因素及非免疫性因素。免疫性因素是指体内ABO血型不合、HLA抗原和HPA抗原不合所产生的相应PLT抗体，此类抗体与表达相应抗原的PLT结合即致敏PLT，从而加速被血液循环系统所清除，导致PTR的发生。同种免疫性抗体是的产生是引起PTR的重要因素[4]。有报道[5]认为，HLA抗体是引起PTR最常见的免疫因素，占所有免疫因素的81.8%，占所有病因的25%。我们的研究结果显示，52例PTR患者中，有40例PLT抗体为阳性，达76.9%，结果提示免疫性因素是引起PTR的主要原因。在40例PLT阳性患者中，有33例检测出HLA-I抗体阳性，占82.5%，说明引起PTR免疫性因素的主要原因与HLA抗原紧密相关。目前PLT纠正指数CCI已被临床广泛应用于评价PLT输注疗效。刘更夫等[6]报道，血小板CD62P表达率越高，CCI越低，血小板输注效果越差；也有报道显示，1h和24h CCI值与血小板抗体是否阳性及患者是否有并发症均有关[7]。本资料结果显示，PLT抗体阳性患者1h及24h的CCI值均明显低于PLT阴性患者，差异均有统计学意义（P<0.01）；PLT抗体阳性组患者的无效输注率显著高于阴性组患者，差异有统计学意义（P<0.01）。结果说明PLT抗体的产生与出现PTR密切相关，提示PLT抗体阳性可预测PTR的发生。同时我们也观察到PLT阳性患者的无效输注率为75%，PLT阴性患者的无效输注率为16.7%，说明PLT抗体阳性未必一定会导致PTR的发生，PLT抗体阴性也可能会发生PTR，提示PLT输注疗效与免疫性因素和非免疫性因素均相关。PLT交叉配型主要是检验受血者血清中是否含有对抗供血者PLT抗原的抗体。我们应用固相凝集法对20例PLT阳性患者进行了HLA及HPA交叉配型试验，结果显示未配型组PLT输注有效率为0.0%，而配型组PLT输注有效率为85.0%，可见PLT交叉配型能明显提高PLT输注有效率。同时我们也发现PLT交叉配型结果虽为阴性，但还有个别患者出现PTR，这是否与患者长期输血后产生PLT同种抗体有关，有待进一步探讨研究。
综上所述，PTR与免疫性及非免疫性因素均有关,对PTR患者进行PLT抗体检测能查明引起PTR的病因,应用PLT交叉配型试验,可为免疫性PTR患者找寻相对匹配的PLT进行输注,减少同种免疫反应的发生,减轻患者的经济负担，避免宝贵血资源的浪费。
参考文献：
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[2] 张趁利，庞桂芝，娄白敏，等.反复输血患者的血小板抗体检测及配型前后
的疗效对比[J].临床输血与检验，2014，01（13）:66-68.
 
[3] 杜春红，徐佩琦，李红学.血小板输注无效相关因素的研究进展[J].临床输血与检验，2016，18（1）：86-90.
[4] 伍伟健 , 卢瑾 , 周健欣，等.佛山地区血小板输注无效患者的血小板输注策略及应用[J].临床输血与检验，2014，16（2）：113-118.
[5] 周燕，李丽兰，钟周琳，等. 南宁地区血小板输注无效患者血小板同种抗体检测及特异性分析[J].临床输血与检验，2015，17（2）：103-106.
[6] 刘更夫,黄飞,梅方超,等. 血小板CD62p表达率与血小板输注效果的关联分析[J].中国输血杂志,2016,29(3):295-297.
[7] 王茂玲，赵婷婷，杨眉,等.白血病患者血小板输注疗效的影响因素分析[J]. 国际检验医学杂志，2015，36（3）:296-297,300.